1、孕激素试验

要求是估计内源性雌激素水平和下生殖道的通畅性，并测定催乳素水平。用黄体酮油剂，每日肌注20mg，连续3日；或口服安宫黄体酮，每日10~20mg，连用5日。停药后3~7日出现撤药出血。提示下生殖道通畅，且子宫有内膜并受一定水平雌激素影响（e2&>146。8pmol/l）。外源性孕激素使其发生分泌期变化，停药后内膜剥脱而出血。

在给予任何激素之前，抽血作激素测定。首先测定血催乳素。如孕激素撤血阳性，无泌乳，催乳素在正常水平，这三个现象同时存在，就可有效地排除垂体肿瘤。

2、雌激素试验

若孕激素试验无撤药出血，有两种可能：或者下生殖道不通畅，或者体内雌激素水平低下，以致对孕激素无反应，应进一步作雌激素试验。患者每晚睡前服己烯雌酚1mg，连续20日或用苯甲酸雌二醇，隔日肌注2mg，共10天，最后5日加用安宫黄体酮，每日口服10mg。停药后3~7日常导致撤药出血，若无撤药出血，则应重复一次雌激素试验，若仍无出血，提示子宫内膜有缺陷或生殖道不通畅，妇科检查通常可了解有无内外生殖道异常；仔细询问病史也可了解有无感染或创伤（刮宫）形成的子宫内粘连。可结合检查诊断子宫性闭经。如停药后有撤药性出血，提示子宫内膜功能正常，对甾体激素有反应，闭经是由于患者体内雌激素水平低落所致，应进一步寻找原因。

3、激素测定

在恰当的时间采取样本测定血中的各种激素水平，可获得卵巢的功能状态及其影响环节等各方面较多的信息，如确定卵巢是否已丧失分泌雌激素的能力，或因缺乏促性腺激素而卵巢不分泌甾体激素。用放射免疫法测定促性腺激素，按血清fsh、lh、prl、e2值来鉴别卵巢或垂体性排卵障碍与闭经。prl正常值为0~20ug/l，prl&>25ug/l，而fsh、lh水平低，则属高催乳素血症（hyperprolactinemia），prl升高时应进一步作头颅ｘ线摄片或ct检查，排除垂体肿瘤。月经周期中fsh正常值为5~20iu/l，lh为5~25iu/l。如fsh、lh值&>40iu/l，此时可能的情况有：卵巢功能障碍、卵巢早衰，或卵巢发育不全、卵巢不敏感综合征、分泌促性腺激素的肿瘤、17羟化酶缺乏引起的原发性闭经等。对原发性闭经患者，应作染色体核型分析及分带检查。若lh&>25iu/l而fsh值正常、e2偏高或正常，特别是lh/fsh＞3时，则可能为多囊卵巢综合征，这时测定雄激素可发现雄烯二酮常上升；若fsh，lh均&<5in/l，示垂体功能减退，病变可能在垂体或下丘脑，而垂体与下丘脑病变的区别，需借助gnrh试验，如结果不明确，则作蝶鞍多向断层摄片或ｃｔ检查有无异常。在多向断层摄片异常时进行眼底检查。

4、gnrh垂体兴奋试验

典型方法：常用10肽lhrh100ug溶于生理盐水5ml中，30秒钟内静脉注射完毕。分别于注射前及注射后15，30，60，120分钟采取2ml静脉血测lh含量，若注射后15~60分钟ｌｈ值较注射前高2~4倍以上，而且绝对值比原来增加7。5ug/l以上，说明垂体功能良好，病变在下丘脑；若经多次重复试验，lh值仍无升高或增高不显著，提示病变在垂体。

combes方法：将lhrh100ug静脉滴注4小时，正常情况在滴注后30~45分钟lh上升，60~90分钟时下降，2~4小时内ｌｈ第二次上升。双相型分泌可用垂体促性腺激素存在两个功能池的理论来解释：即分泌池在lhrh刺激下立即释放lh；合成、贮存池则在lhrh大量或长期刺激下释放已贮存与新合成的lh。此法可准确区别下丘脑或垂体病变。若病因在下丘脑而引起垂体惰性，则lhrh推注试验可能阴性，而滴注试验可在2小时左右出现延迟反应。若垂体功能有缺陷，ｌｈ虽有第一次上升，但不能维持，且不出现第二次上升，提示垂体合成ｌｈ的功能受限，故如疑有创伤、手术、辐射等因素导致垂体功能不足时，为静脉滴注gnrh刺激试验的适应指征。

5、克罗米酚试验

克罗米芬是非固醇类激素，有弱的抗雌激素作用，可促进fsh，lh分泌，对有一定量内源性雌激素有效。对孕激素试验阳性反应者在撤药出血的第5日起口服克罗米芬50~100mg/日，共5日，通过bbt和ｂ超观察用药后月经和排卵反应。本试验阳性常提示轻度下丘脑性闭经。如果临床或生化证实有良好反应，则基本上可排除生殖轴的器质性病变。

克罗米芬试验还适用于怀疑延迟发育的妇女，以判定其生殖轴是否正常，如测定fsh与lh均减退，克罗米酚试验常阴性，故不必采用。

6、促性腺激素试验

克罗米芬试验阴性，孕激素试验或雌孕激素试验阳性者，于撤药出血第5日起肌注hmg70~150iu/日，在连续用药过程中，经监测提示卵泡成熟时，再肌注hcg5000~10000iu/日，若有排卵即促性腺试验阳性。

7、acth兴奋试验

acth30mg，肌注，分别测用药前和后24小时尿17-酮类固醇排泄量。pco者反应正常，而肾上腺皮质功能异常者17-酮类固醇和17－羟类固醇均明显增高。

8、地塞米松抑制试验

适用于排卵障碍伴高雄激素血症或男性化患者。地塞米松0。5mg，每6小时一次，共2日或7日，比较用药前尿17-酮类固醇、17-羟类固醇、血睾酮、血脱氢表雄酮等变化。若垂体－肾上腺皮质轴功能正常，则用药后由于负反馈作用，抑制acth，尿17-酮类固醇和17-羟类固醇值降低。但cushing综合征或肾上腺皮质肿瘤患者则不降低。

9、促甲状腺素释放素（trh）刺激试验

trh为一种三肽，能刺激垂体细胞，分泌促甲状腺素与催乳素。患者先排尿，卧床休息20分钟。将100ugtrh溶于生理盐水中快速静脉注射。在5，10，15，30与60分钟抽血作测定。